第一篇：沙盤實驗個人總結(jié)

沙盤實驗個人總結(jié)

剛聽說沙盤時很茫然，根本就不知道是什么意思，再加上看了一下有關(guān)知識的www.seogis.coml或者1g待測樣品中菌落的個數(shù)，一定要注意的是單位是cfu/ml或cfu/g。還有就是要掌握好對高壓蒸汽滅菌鍋的操作。實驗之前要充分做好預(yù)習(xí)工作，以便實驗的進行。由于是測定微生物實驗，就要尤其小心其他雜菌的混入影響實驗結(jié)果。因此要做好實驗儀器和各種試劑的滅菌，有培養(yǎng)皿，試管，移液槍頭（裝在盒子中），按要求配置好的瓊脂培養(yǎng)基和生理鹽水，按各自要求用紗布和報紙包扎好，送入高壓蒸汽滅菌鍋進行滅菌。玻璃儀器在包扎前要進行清洗，并烘干，以免水分沾濕報紙。滅完菌后取出物品進入超凈工作臺，超近工作臺的紫外燈在進入20分鐘前開啟，并在進入時關(guān)閉，以免影響人體。要對臺面進行消毒處理，用酒精擦拭�？梢栽诘却�瓊脂培養(yǎng)基冷卻到50攝氏度左右前對待測樣品進行10倍系列稀釋至需要的濃度。要注意的是一定要標(biāo)記好濃度或者按順序排列在試管架上以免弄混，同一個試管里吸取樣品才能用同一個槍頭進行移液。再進行平板接種。待瓊脂培養(yǎng)基冷卻好后，用右手打開紗布并將錐形瓶拿住，將瓶口靠近酒精燈再進行滅菌，左手拿培養(yǎng)皿用大拇指和食指稍微打開培養(yǎng)皿蓋，將瓊脂培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中心內(nèi)，不用倒很多，使瓊脂培養(yǎng)基沒過培養(yǎng)皿表面即可。培養(yǎng)皿一定是平拿在手上的，倒好后輕輕蓋上培養(yǎng)皿蓋，緩慢地平方在超凈工作臺臺面邊緣處，再推至中間。再用移液槍取1ml樣品快速打入培養(yǎng)皿中央，蓋上培養(yǎng)皿蓋，然后用手輕輕搖晃，千外不要太大力。然后貼上標(biāo)簽記號，靜置。如此依次操作下去。靜置一段時間待培養(yǎng)基凝固后倒置放入恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)一段時間再取出進行觀察計數(shù)。

我們組的實驗結(jié)果不甚理想，培養(yǎng)皿中的微生物都是連成一片的，或者是培養(yǎng)皿壁上也都長著，主要是由于待測樣品打入培養(yǎng)皿后，搖晃不均勻或者太大力了，以至于菌液沒分散開來或是跑到培養(yǎng)皿壁上去了。

第一個實驗的操作室下面四個實驗的操作基礎(chǔ)�；�本操作步驟都是相似的，只是待測微生物不同和根據(jù)不同微生物要配置不同的瓊脂培養(yǎng)基。

第二個實驗是霉菌和酵母的檢查和計數(shù)。用到的培養(yǎng)基是馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基和孟加拉紅培養(yǎng)基，都是用于培養(yǎng)霉菌和酵母的。要注意的地方與第一個實驗一樣是滅菌和避免引入雜菌，還有就是，混勻菌液時要慢慢地、輕輕地移動培養(yǎng)皿。這個實驗有兩個菌要觀察，不過由于兩個菌的菌落形態(tài)差異比較大，所以還是比較簡單就能識別的：

孟加拉紅培養(yǎng)基中，菌落的紅色比培養(yǎng)基的紅色顏色更重，菌落顏色是大紅色，培養(yǎng)基顏色是粉紅色。在孟加拉紅培養(yǎng)基表面的酵母菌菌落是圓形，邊緣整齊，表面比較光滑濕潤，形態(tài)較小。位于孟加拉紅培養(yǎng)基內(nèi)的菌落則是三角形和四角形，還有多角形。邊緣都是整齊的，不像霉菌菌落的邊緣有菌絲。霉菌形成的菌落較稀松，多成絨毛狀，絮狀，形態(tài)與酵母相比較大。

第三個實驗是乳酸菌的檢驗。用到的培養(yǎng)基是mrs培養(yǎng)基、莫匹羅星鋰鹽改良 mrs 培養(yǎng)基和mc 培養(yǎng)基，mrs培養(yǎng)基培養(yǎng)的是乳酸菌，莫匹羅星鋰鹽改良 mrs 培養(yǎng)基培養(yǎng)的是雙歧桿菌，mc 培養(yǎng)基培養(yǎng)的是嗜熱鏈球菌。乳酸菌總數(shù)結(jié)果減去雙歧桿菌與嗜熱鏈球菌計數(shù)結(jié)果之和即得乳桿菌計數(shù)。

要注意的是該實驗用的是平板涂布法接種，是待培養(yǎng)基凝固后吸取1ml酸奶樣品稀釋勻液，用無菌涂布棒涂抹均勻。倒置培養(yǎng)一段時間，觀察菌落形態(tài)及計數(shù)菌落。由于乳酸菌和雙歧桿菌都是需要厭氧培養(yǎng)的，所以要求從樣品稀釋到平板涂布要求在15分鐘內(nèi)完成。

第四個實驗是微生物藥敏試驗。本實驗主要用了2種方法：紙片擴散法和牛津杯法。紙片擴散法是將含有定量抗菌藥物的濾紙片貼在已接種了測試菌的瓊脂表面上，紙片中的藥物在瓊脂中擴散，隨著擴散距離的增加，抗菌藥物的濃度呈對數(shù)減少，從而在紙片的周圍形成濃度梯度。同時，紙片周圍抑菌濃度范圍內(nèi)的菌株不能生長，而抑菌范圍外的菌株則可以生長，從而在紙片的周圍形成透明的抑菌圈，不同的抑菌藥物的抑菌圈直徑因受藥物在瓊脂中擴散速度的影響而可能不同，抑菌圈的大小可以反映測試菌對藥物的敏感程度，并與該藥物對測試菌的最小抑菌濃度（mic）呈負相關(guān)。牛津杯法加的是試劑，卡那霉素試劑和醫(yī)用酒精，查看它們對細菌的抑菌效果。

要注意2種方法都需要空白對照試驗實驗，前者為不加任何東西的滅菌小圓濾紙片，后者為無菌水。用的也是平板涂布法接種。1法：鑷子在夾有抗菌物質(zhì)的紙片和不加任何東西的滅菌小圓濾紙片時都要進行酒精燈滅菌，以免影響實驗準(zhǔn)確度。2法：在涂布好的培養(yǎng)基表面用鑷子輕輕置滅好菌的牛津杯。注意不用按壓的，不然擠壓會致培養(yǎng)基表面破裂，會影

響實驗結(jié)果。待培養(yǎng)好后取出觀察并測量抑菌圈直徑，結(jié)果單位用毫米計。

第五個實驗是自主設(shè)計實驗環(huán)境因素對微生物生長的影響。選取3個環(huán)境因素物理、化學(xué)和生物因素均可進行設(shè)計。根據(jù)前四個實驗的基礎(chǔ)，通過小組探討和交流設(shè)計出實驗方案。并加以驗證。通過自主設(shè)計實驗可以結(jié)合小組的智慧，加強團隊協(xié)作精神和創(chuàng)新思維，通過實驗可以驗證理論，增加感性認識，培養(yǎng)獨立工作能力和思考能力，并使具有過硬的專業(yè)技術(shù)水平。

通過這次的實驗，我明白了任何事情丟不是一蹴而就的，而是一個慢慢積累的過程。雖然實驗結(jié)果不是很理想，但是我參與了過程，通過小組討論我們也分析了失敗的原因，找到了解決的方法，避免了下一次失誤。并且從中理解了團隊討論和合作的重要性。以上即是我的全部感想。

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